Princip radnog načela hromatografije Hladnjak zasnovan je na hromatografskoj tehnologiji. Smjesa koja se razdvaja je dovedena u kromatografsku kolonu kroz određenu mobilnu fazu. Smjesa komunicira s stacionarnom fazom u stupcu kromatografije, a različite komponente su odvojene zbog različitih koeficijenata distribucije između stacionarne faze i mobilne faze. Specifični proces je sljedeći:
Smjesa ulazi u stupac kromatografije: otopina uzorka pumpa se u stupac kromatografije, a komponente u smjesi ulaze u stupac kromatografije pod djelovanjem mobilne faze.
Proces razdvajanja: Komponente u smjesi komuniciraju s stacionarnom fazom u stupcu kromatografije. Stacionarna faza je obično kovalentno vezana liganda na nerastvorljivoj matrici, koja ima specifičnu sposobnost vezivanja s ciljanim molekulom. Ciljna molekula bit će vezana za liganda i ostala na stacionarskoj fazi, dok se druge nečistoće ne mogu vezati za ligandu i prolazi s mobilnom fazom.
Proces elulacija: ciljna molekula može se iz liganda biti eluiran od strane odgovarajućeg eluen za dobivanje pročišćenog ciljnog molekula.
